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液相色谱柱使用维护心得,这次全给你!
点击次数:31 发布时间:2019-07-30 打印本页面 返回

 

液相色谱柱在使用过程中常见问题

 

液相色谱是一种高效的分析手段,液相色谱柱是色谱分析系统的“心脏”,由于被分析样品种类繁多,加之样品基质复杂,色谱柱极易被强保留物质污染。这些强保留物质通常难以洗脱,多次上样后,聚集在柱头端,堵塞筛板,甚至可能与填料发生相互作用导致填料变性,这会导致柱效下降,分离度降低和峰型异常等现象。因而液相色谱柱的维护是十分必要的。

 

        

正常的筛板                                                         堵塞的筛板

 

月旭科技液相色谱柱维护

 

液相色谱柱需要维护,但是不同厂家的色谱柱维护方式各不相同。月旭科技液相色谱柱推荐正向使用,反向冲洗。因为月旭的色谱柱两端用的筛板孔径是一样的,不会存在反冲时把填料冲出来的情况。当做完样品分析后,绝大部分污染物都富集于柱头端,这个时候如果立即进行反冲可以很大程度上延长色谱柱填料寿命。

 

 

液相色谱柱如何反冲

 

液相色谱柱反冲时遵循的原则是用比流动相洗脱能力更强的溶剂冲洗。

 

反相色谱柱(C18、C8)可以选择极性较小的溶剂反向冲洗,推荐如下冲洗方法:

水→甲醇→乙腈→异丙醇→二氯甲烷→异丙醇→乙腈

 

正相色谱柱(SiO2, NH2,CN, DIOL)可以选择极性较大的溶剂反向冲洗,冲洗方法如下:

正己烷→二氯甲烷→乙酸乙酯→异丙醇→乙腈→甲醇

 

如果流动相中含有缓冲盐,在运行序列过程中出现柱压异常升高的现象,则发生了缓冲盐在色谱柱柱床上析出,推荐采用如下维护方法:

• 用甲醇/水=10/90以分析流速35℃柱温反向冲洗色谱柱60个柱体积;

• 用甲醇/水=10/90以0.2ml/min流速反向冲洗色谱柱过夜。

 

含缓冲盐的流动相正确使用方法:

 

 

例子:流动相中有缓冲盐,尝试用10%甲醇 0。2ml/min反向冲洗一晚上后柱效恢复正常。

色谱柱:Ultimate XB-C18, 4.6×250mm,5μm。

波长  :254nm;

流动相:甲醇-水=75:25;

温度  :25℃;

流速  :1.0ml/min;

进样量:20μL。

 

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